飽和油紅O染液的正確使用方法
飽和油紅O染液的使用方法:(僅供參考)
1、工作液配置:飽和油紅O原液按3:2(油紅O:蒸餾水)加入蒸餾水,混勻,室溫放置5-10min,過(guò)濾后使用。
2、染色程序
1)切片用甲醛-鈣固定10分鐘;
2)蒸餾水充分洗滌;
3)60%異丙醇浸洗;
4)油紅O染液染色10分鐘(染液可回收再利用);
5)60%異丙醇分化至間質(zhì)清晰;
6)蒸餾水洗;
7)Mayer蘇木素復(fù)染;
8)蒸餾水洗;
9)甘油明膠封片。
3、 顯微鏡觀(guān)察結(jié)果:組織細(xì)胞中脂滴呈鮮紅色,細(xì)胞核呈藍(lán)色,間質(zhì)無(wú)色。
飽和油紅O染色液使用注意事項(xiàng):
1.為了您的**和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
2.油紅O染色時(shí)應(yīng)避免試劑揮發(fā)過(guò)多,否則易形成背景沉淀。染色時(shí)染色液應(yīng)充分覆蓋組織細(xì)胞。
3.60%異丙醇分化,可在鏡下控制至脂肪組織呈鮮紅色,間質(zhì)無(wú)色時(shí)為度。建議使用蘇木素復(fù)染,增加染色對(duì)比度。
4.**次使用本試劑時(shí)建議先取1-2個(gè)樣品做預(yù)實(shí)驗(yàn)。
飽和油紅O染液的原理:
油性紅O(Oil Red O)是一種脂溶性偶氮染料,是很強(qiáng)的脂溶劑和染脂劑,能特異性地使組織和細(xì)胞內(nèi)中性甘油三脂、脂質(zhì)以及脂蛋白等染色。當(dāng)組織切片置入染液時(shí),染料則離開(kāi)染液而溶于組織內(nèi)的脂質(zhì)(如脂滴)中,使組織內(nèi)的脂滴呈紅色。用于分析細(xì)胞樣品中脂質(zhì)狀況。