BL21 (DE3) Chemically Competent Cell BL21 (DE3)化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞

產(chǎn)品描述

本品是在大腸桿菌BL21（DE3）菌株基礎(chǔ)上制備的化學(xué)轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞，是以T7 RNA聚合酶為表達(dá)系統(tǒng)的基因的高效表達(dá)宿主，其基因型為F^-ompT hsdS (r_B^- m_B^-) gal dcm (DE3)。經(jīng)檢測(cè)，本品無外源質(zhì)粒DNA殘留，轉(zhuǎn)化效率≥10⁷ cfu/μg pUC19 DNA。適合非毒性蛋白重組表達(dá)。

BL21 (DE3) Chemically Competent Cell BL21 (DE3)化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞

運(yùn)輸和保存方法

干冰運(yùn)輸。

BL21 (DE3)化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞-80℃保存，pUC19質(zhì)粒≤-20℃保存。有效期半年。

注意事項(xiàng)

1）感受態(tài)細(xì)胞冰水浴中解凍后應(yīng)立即使用。BL21 (DE3) Chemically Competent Cell BL21 (DE3)化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞

2）待轉(zhuǎn)化DNA加入體積不要超過感受態(tài)細(xì)胞體積的1/10。

3）待轉(zhuǎn)化DNA加入感受態(tài)細(xì)胞后，請(qǐng)勿用移液槍吹打，輕輕彈勻即可。

4）為確保*高效率轉(zhuǎn)化，整個(gè)操作過程應(yīng)盡量輕柔，并保持低溫。

5）本品應(yīng)于-80℃保存，請(qǐng)勿將感受態(tài)細(xì)胞儲(chǔ)存于-20℃或液氮中保存。

6）為了您的**和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

BL21 (DE3) Chemically Competent Cell BL21 (DE3)化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞使用方法

1）將感受態(tài)細(xì)胞從-80℃中取出，置于冰水浴中融化。

2）將待轉(zhuǎn)化DNA加入到100 μl感受態(tài)細(xì)胞中，輕輕彈勻，冰上孵育30分鐘。

3）42℃水浴，不要晃動(dòng)，準(zhǔn)確熱激90s后，立刻置于冰水浴中，靜置2-3分鐘。

4）向離心管中加入900 μl LB或SOC培養(yǎng)基，37℃水浴鍋中靜置10分鐘。

5）150 rpm, 37℃振蕩培養(yǎng)45分鐘，使菌體復(fù)蘇，抗性基因表達(dá)。

6）2,500 g離心5分鐘，去掉900 μl上清。用剩余培養(yǎng)基將菌體重懸，用無菌涂布棒在含有正確抗性的平板上輕輕涂勻。室溫正置10分鐘。待菌液被平板吸收后，37℃倒置培養(yǎng)過夜。

【注】：也可直接吸取100-200 μl孵育后的菌液涂板。剩余菌液可在4℃保存，一周之內(nèi)都可重新涂板。BL21 (DE3) Chemically Competent Cell BL21 (DE3)化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞