產品描述
SYBR Green I,一種靈敏度非常高的dsDNA熒光染料,常用于核酸瓊脂糖凝膠/聚丙烯酰胺凝膠電泳。SYBR Green I染料的*大激發波長為497nm,但是在~290nm和~380nm處有二級激發峰。與DNA結合的SYBR Green I染料的熒光發射集中在520nm。因此,該染料可適用于多種凝膠檢測儀。
本品是溶于DMSO的SYBR Green I 10,000×染液。
運輸和保存方法
冰袋運輸。于-20°C避光保存,有效期1年。SYBR Green I (10,000× in DMSO) 核酸凝膠染料
注意事項
1)獨立實驗室進行的艾姆斯試驗表明SYBR Green I 的致突變性明顯比溴化乙錠要低得多,目前尚無關于SYBR Green I 染料對人體的致突變性或毒性的數據,但我們必須提醒用戶注意,該染料能與DNA結合,因此,它應當被看做潛在誘變劑,在使用前小心謹慎。另外,在處理DMSO儲存液時應特別小心,因為DMSO能促進有機分子進入組織。染料的處理應當符合當地的規定。
2)為了您的**和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
使用方法
【開始使用前】
使用前將本品取出并回溫至室溫,使DMSO徹底解凍、溶液均一。于離心機上短暫離心確保所有溶液至管底。**次使用時可將本品分裝成多個小份后凍存,小份染料將更快速熔解。SYBR Green I (10,000× in DMSO) 核酸凝膠染料
一、 染色
1 電泳后DNA染色
1)在瓊脂糖或非變性聚丙烯酰胺凝膠上進行電泳。
【注】:TBE和TAE緩沖液均適合于SYBR Green I染料。
2)用TE、TAE或TBE將SYBR Green I進行10000倍稀釋。
【注】:① SYBR Green I染色對pH敏感,為獲得*佳的靈敏度,應確認在染色溫度下染色液的pH值在7.5-8.0之間(pH8.0更佳)。
② 用水配制的染色液不如用緩沖液配制的穩定,為得到較好靈敏度,必須在24h內使用。
SYBR Green I (10,000× in DMSO) 核酸凝膠染料3)染液要充分覆蓋凝膠,室溫輕搖孵育10-40min。
【注】:① 推薦用塑料而不是玻璃容器來儲存染色液,應為染料會吸附到玻璃表面。
② 染色過程避光進行,建議在容器上加蓋鋁箔或置于暗處。
③ 凝膠厚度及瓊脂糖或聚丙烯酰胺的比例不同,染色時間將有所不同。
④ 無需脫色。
⑤ 染液可置暗處(*好是冷藏)放置至少1周,重復使用*多4次。SYBR Green I (10,000× in DMSO) 核酸凝膠染料