EB(10 mg/ml in water)EB水溶液(10 mg/ml)
產品描述
溴化乙錠,英文名Ethidium bromide,縮寫EB,一種DNA嵌入劑,可插入DNA/RNA中,其插入雙鏈RNA、雙鏈DNA后熒光強度分別增強21倍、25倍,因此在低濃度(10μg/ml)染色后無需脫色,是分子生物學常用的一種核酸染料、移碼誘變劑、DNA/RNA酶抑制劑。溴化乙錠已用于核酸的許多熒光分析,還可結合到單鏈 DNA(雖然強度不高)和三鏈 DNA 上。另外,EB可與吖啶橙結合用于區分存活的、凋亡和壞死的細胞。
本品為10mg/ml的溴化乙錠儲存液,用于電泳檢測時,工作濃度為0.5μg/ml。EB(10 mg/ml in water)EB水溶液(10 mg/ml)
產品性質
運輸和保存方法
室溫運輸。室溫避光保存。有效期2年。EB(10 mg/ml in water)EB水溶液(10 mg/ml)
使用方法
一、膠染法(電泳前染色)
1. 制膠時加入EB 核酸染料使其工作濃度0.5μg/ml(每50mL 瓊脂糖溶液中加入2.5μL 10mg/ml EB水溶液)。
2. 按照常規方法進行電泳。
注意事項
1) 此方法比較節省染料,250 μL(10mg/ml)染料大約可以做100塊 50mL的膠。
2) EB兼容所有常用的電泳緩沖溶液。
3) 膠染法不適合預制聚丙烯酰胺凝膠,對于聚丙烯酰胺凝膠請使用泡染法。
4) 在染料的存在下,線狀雙鏈DNA的遷移率減小了15%。
二、泡染法(電泳后染色)
1. 按照常規方法進行電泳。EB(10 mg/ml in water)EB水溶液(10 mg/ml)
2. 室溫下將電泳后的凝膠在含有EtBr (0.5ug/ml)的電泳緩沖液或水中浸泡30-45min。
3. (可選)對于檢測較小量DNA(<10ng),可將EB染色后的凝膠于水或1mM MgSO4 中室溫脫色20min,從而降低因未結合EB引起的背景熒光信號。