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產品資料

白細胞裂解液

如果您對該產品感興趣的話,可以
產品名稱: 白細胞裂解液
產品型號: HZ25-08060
產品展商: HZbscience
產品文檔: 無相關文檔

簡單介紹

白細胞裂解液主營產品包括RNA純化系列、DNA純化系列、電泳及回收系列、克隆表達系列等在分子水平上,分子生物學著重研究的是大分子,白細胞裂解液主要是蛋白質,核酸,脂質體系以及部分多糖及其復合體系。而一些小分子物質在生物體內的轉化則屬生物化學的范圍.


白細胞裂解液  的詳細介紹

白細胞裂解液堿變性提取質粒DNA是基于染色體DNA與質粒DNA的變性與復性的差異而達到分離目的。在pH高達12.6的堿性條件下,染色體DNA的氫鍵斷裂,雙螺旋結構解開而變性。質粒DNA的大部分氫鍵也斷裂,但超螺旋共價閉合環狀的兩條互補鏈不會完全分離,當以pH4.8NaAc高鹽緩沖液去調節其pH至中性時,變性的質粒DNA又恢復原來的構型,白細胞裂解液保存在溶液中,而染色體DNA不能復性而形成纏連的網狀結構,通過離心,染色體DNA與不穩定的大分子RNA、蛋白質-SDS復合物等一起沉淀下來而被除去。

         

白細胞裂解液注意事項     

1.  RNApure Reagent用量少于2ml時建議使用清潔的一次性的聚丙烯材質試管。

2.  RNApure Reagent用量較大時,可以使用玻璃試管(Corex)或聚丙烯材質試管,事先檢驗以確保該試管可以耐受加入RNApure Reagent和氯仿后12,000×g的離心力。不可使用有裂縫或者破損的試管。

3.  離心前小心平衡試管。

4.  離心前玻璃管口必須蓋上鋁箔并用石蠟膜封口,聚丙烯管必須蓋緊。

5.  從少量的組織(1~10mg)或細胞(102~104)中分離RNA樣品:調整樣品體積到0.25ml,往組織或細胞中加入0.75ml RNApure Reagent白細胞裂解液待樣品裂解后,加入氯仿并進行步驟2中的抽提操作。在用異丙醇沉淀RNA之前,加入5~10μgRNA酶的glycogen作為水樣層的載體。為降低其黏度在加入氯仿前用26號注射器抽吸兩次以切斷基因組DNAGlycogen會留在水樣層中并和RNA共析出。在濃縮到4mg/ml之前它不會抑制逆轉錄反應**鏈的合成也不會抑制PCR

6.  在勻漿化后和加入氯仿之前,樣品可以在–60~70°C保存至少一個月。RNA沉淀(步驟4RNA漂洗)放置于75%的乙醇在2~8°C至少可以保存一周,在–5~20°C下至少可保存一年。

7.  臺式離心機白細胞裂解液*大能達到2,600×g的離心力的,如果將離心時間延長到30~60分鐘可以滿足步驟2和步驟3中的操作。

滬公網安備 31011702004356號

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