pET-44a(+)載體基本信息
別名: | pET44a, pET 44a |
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質粒類型: | 大腸桿菌蛋白表達 |
表達水平: | 高 |
克隆方法: | 多克隆位點,限制性內切酶 |
載體大小: | 7311 bp |
5' 測序引物序列: | T7: 5'-TAATACGACTCACTATAGGG-3' |
3' 測序引物序列: | ColiDOWN: 5'-TTCACTTCTGAGTTCGGCATG-3' |
載體標簽: | C-HSV, N-His, C-His, N-Thrombin, N-Nus, N-EK |
載體抗性: | 氨芐 |
表達宿主菌: | BL21(DE3) 、 Rosetta2(DE3)、C43(DE3) |
備注: |
載體同時含有N端及C端His標簽; 含有N端Thrombin和EK蛋白酶酶切位點; pET44a,b,c 載體的差異主要是在多克隆位點.
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產品目錄號: | 71122-3 |
穩定性: | 瞬時表達 |
組成型: | 組成型 |
病毒/非病毒: | 非病毒 |
pET44系列載體是設計用來克隆和高水平表達含有495個氨基酸的Nus標簽的蛋白表達載體。與pET-43.1系列載體相比,pET44系列載體額外編碼一個N端的His蛋白純化標簽。 pET42a載體的單一的多克隆位點見上面的環狀質粒圖譜。注意:載體序列是以pBR322質粒的編碼規矩進行編碼的,所以T7蛋白表達區在質粒圖譜上面 是反向的。T7 RNA聚合酶啟動的克隆和表達區域在質粒圖譜中也被標注了出來。質粒的F1復制子是被定向的,所以在T7噬菌體聚合酶的作用下,包含有蛋白編碼序列的病毒 粒子能夠產生,并啟動蛋白表達,同時蛋白表達將被T7終止子序列(Cat. No. 69337-3)的作用下終止蛋白翻譯。對pET44a載體的單鏈測序可以使用COLIDOWN primer(Cat. No. 70845-3).< 把表達的基因插入到載體的PshAI或者SmaI限制性內切酶位點時,可以通過EK蛋白酶或者Thrombin蛋白酶將融合表達的Nus標簽完全切除。