pET32系列載體是設(shè)計用來克隆構(gòu)建和高水平融合表達表達帶有109個氨基酸Trx標簽的蛋白質(zhì)序列。將基因插入到載體的多克隆位點,能夠獲得融合表達蛋白質(zhì)。同時融合蛋白包含有His標簽和S標簽,這些可以用于蛋白表達檢測和純化過程。
載體的多克隆位點見上面的圖譜。需要注意的是圖譜中的核苷酸編碼順序是以pBR322載體的復(fù)制方向為正方向,所以T7表達區(qū)域在圖譜中是處于反向的位置。T7 RNA聚合酶啟動的克隆和表達區(qū)域在質(zhì)粒圖譜中也被標注了出來。質(zhì)粒的F1復(fù)制子是被定向的,所以在T7噬菌體聚合酶的作用下,包含有蛋白編碼序列的病毒 粒子能夠產(chǎn)生,并啟動蛋白表達,同時蛋白表達將被T7終止子序列(Cat. No. 69337-3)的作用下終止蛋白翻譯。