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產品資料
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pBApo-EF1α-neo

如果您對該產品感興趣的話,可以
產品名稱: pBApo-EF1α-neo
產品型號:
產品展商: HZbscience
產品文檔: 無相關文檔

簡單介紹

pBApo-EF1α-neo的各批次質粒菌株發貨前均經過嚴格的多重驗證,如存在質量問題,請在收到產品的三個月內通知我司。收到pBApo-EF1α-neo后請短暫離心,取2μl轉化至對應感受態中,挑取單克隆重新提取質粒后使用。


pBApo-EF1α-neo  的詳細介紹

pBApo-EF1α-neo載體基本信息

載體名稱: pBApo-EF1α-neo
質粒類型: 哺乳動物細胞表達載體
高拷貝/低拷貝: 低拷貝
克隆方法: 限制性內切酶,多克隆位點
啟動子: EF1α
載體大小: 5167 bp
5' 測序引物及序列: --
3' 測序引物及序列: --
載體標簽: 無標簽
載體抗性: 氨芐青霉素
篩選標記: 新霉素(Neomycin)
克隆菌株: TOP10, DH5α, JM109
宿主細胞(系): 常規細胞系,293、CV-1、CHO等
備注: pBApo-EF1α-neo載體可用來表達microRNA和其它轉錄產物;
很容易將{promoter+ORF+PolyA signal}框轉移到腺病毒 載體上,用于構建腺病毒載體。
產品目錄號: 3243
穩定性: 瞬表達 或 穩表達
組成型/誘導型: 組成型
病毒/非病毒: 非病毒

pBApo-EF1α-neo載體質粒圖譜和多克隆位點信息

pBApo-EF1α-neo

pBApo-EF1α-neo載體簡介

pBApo-EF1α-Neo DNA是一種簡單的應用于哺乳動物細胞的基因表達載體。該載體具有人多肽鏈延伸因子基因來源的啟動子 (EF1α promoter)、單純皰疹病毒胸苷激酶來源的polyA信號、新霉素抗性基因。通過在MCS區域插入目的基因的開放閱讀框 (ORF),構建目的基因表達載體。除了通常的基因以外該載體可以用于pri-microRNA的轉錄。此外,還可以很容易地將 (promoter+ORF+PolyA signal) 從這個載體上轉移到腺病毒載體上,尤其是轉移到Adenovirus Dual Expression Kit (Code No.: 6170) 的組分pAxcwit上。腺病毒載體感染效率高,范圍廣,可以用于體外和體內的基因轉導。

使用方法
1. 插入基因
在質粒載體的克隆位點處插入目的基因的開放閱讀框(ORF)。因為載體上有氨芐青霉素抗性基因,可以從大腸桿菌中篩選重組體。
2. 轉染
使用 TransIT 系列、Xfect 系列(Clontech)等轉染試劑將質粒導入細胞內。轉染條件請參考轉染試劑的實驗流程。
3. 轉染細胞的篩選
pBApo-EF1αNeo DNA 具有新霉素抗性基因、pBApo-EF1αPur DNA 具有嘌呤霉素抗性基因,可以利用***篩選轉染細胞。
在質粒轉染后培養 24 小時以上,開始使用***篩選。在細胞密度較高的情況下,可以適當地稀釋細胞后重新培養。每 3~4 天更換含***的培養基。通常 1~2 周可以獲得轉染細胞的克隆。由于不同細胞對***的耐藥性不同,需要研討適合的***濃度。通常 NeoR(新霉素)濃度為 500~1,000 μg/ml,PurR(嘌呤霉素)濃度為 1~3 μg/ml。
4. 置換表達框(unit)
pBApo-EF1α系列載體經過 Cla I 或 EcoR V 酶切,將表達框(unit)(EF1a promoter+插入基因+PolyA signal)從質粒中切出,可以輕易地轉移至其他載體上。特別是 Adenovirus Dual Expression Kit(Code
No. 6170),該載體多克隆位點上有 Cla I 和 Smi I 酶切位點,可以很輕易地將表達框轉移至腺病毒載
體上。(EcoR V 和 Smi I 都產生是平滑末端,適合片段與腺病毒載體連接) 

pBApo-EF1α-neo載體序列

hz-8129R CCDC36/CT74  腫瘤/睪丸抗原74抗體
hz-8130R CCDC38  卷曲螺旋結構域蛋白38抗體
hz-8131R CCDC42  卷曲螺旋結構域蛋白42抗體
hz-8132R CCDC43  卷曲螺旋結構域蛋白43抗體
hz-8133R CCDC46  卷曲螺旋結構域蛋白46抗體
hz-8134R CCDC47  卷曲螺旋結構域蛋白47抗體
hz-8135R CCDC54/NYD-SP17  卷曲螺旋結構域蛋白54抗體
hz-2415R Ankyrin G  錨定蛋白G抗體
hz-8136R CCDC61  卷曲螺旋結構域蛋白61抗體
hz-8137R CCDC63  卷曲螺旋結構域蛋白63抗體
hz-8138R CCDC8  卷曲螺旋結構域蛋白8抗體
hz-8139R CCDC83  卷曲螺旋結構域蛋白83抗體
hz-8140R CCDC87  卷曲螺旋結構域蛋白87抗體
hz-2040R ANP  心鈉素抗體
hz-8141R CCDC88B/BRLZ/HkRP3  大腦亮氨酸拉鏈結構域蛋白抗體
hz-8142R CCDC92  卷曲螺旋結構域蛋白92抗體
hz-8143R CCDC93  卷曲螺旋結構域蛋白93抗體
hz-8144R CCDC96  卷曲螺旋結構域蛋白96抗體
hz-8145R CHCHD5  卷曲螺旋結構域蛋白CHCHD5抗體
hz-8146R CHCHD6  卷曲螺旋結構域蛋白CHCHD6抗體
hz-8148R CHCHD8  卷曲螺旋結構域蛋白CHCHD8抗體
hz-8149R Slc22a5  溶質載體家族蛋白22成員5抗體
hz-8150R NPFF/FMRFamide  **痛覺調節肽NPFF抗體
hz-8151R FAM36A  FAM36A蛋白抗體

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