KFB【人腎成纖維細(xì)胞】代數(shù)低，狀態(tài)好，發(fā)貨快，細(xì)胞庫管理規(guī)范，種類齊全，價格優(yōu)惠，在做傳代細(xì)胞培養(yǎng)之前，首先將培養(yǎng)瓶置于顯微鏡下，觀察培養(yǎng)瓶中細(xì)胞是否已長成致密單層，如已長成單層，即可進(jìn)行細(xì)胞的傳代培養(yǎng)。
KFB【人腎成纖維細(xì)胞】描述
細(xì)胞生長：貼壁
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞數(shù)量：1×106個
細(xì)胞傳代：1:3傳代,2-3天傳一代
細(xì)胞純度：92.2％
細(xì)胞活力：88.4％（Viability by Trypan Blue Exclusion）
細(xì)胞檢測：細(xì)胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、**、酵母和**
細(xì)胞凍存：液氮凍存（完全培養(yǎng)基+10%DMSO+20%FBS）
細(xì)胞運(yùn)輸：干冰運(yùn)輸（1
Vial）或活細(xì)胞運(yùn)輸（T-25
flasks）
細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和**
KFB【人腎成纖維細(xì)胞】培養(yǎng)條件
EMEM,90%；上等胎牛血清，10%
氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%
溫度：37攝氏度
KFB【人腎成纖維細(xì)胞】傳代方法
顯微鏡下觀察細(xì)胞，當(dāng)覆蓋80%底面積時，進(jìn)行細(xì)胞傳代。注意不要等到細(xì)胞覆蓋100%的時候才傳代，那樣細(xì)胞容易老化。在生物**柜或者超凈臺中，將培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基倒到廢液缸中用PBS或者生理鹽水洗一遍加入1.5ml
0.25%含有EDTA的胰酶，在37℃培養(yǎng)箱中消化3-5分鐘后取出細(xì)胞，加入5ml培養(yǎng)基，吹打均勻后，轉(zhuǎn)移到15ml離心管中，1000rpm 離心5分鐘離心后，去掉上清，用新鮮培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，按照1:3的比例進(jìn)行細(xì)胞傳代培養(yǎng)。
KFB【人腎成纖維細(xì)胞】傳代密度均勻，有以下幾點(diǎn)比較重要：
1.盡量消化細(xì)胞分散成單細(xì)胞懸液。對于易于消化的細(xì)胞，我一般DPBS清洗一遍，加0.5ml胰酶潤洗一遍（25cm2培養(yǎng)瓶或6孔板），棄掉胰酶，37度消化2-3分鐘或室溫消化5min左右，鏡下觀察是否細(xì)胞消化較為分散。如果不夠，延長消化時間。我見過有些剛進(jìn)實(shí)驗(yàn)室的師弟師妹，一上來就加1-2ml胰酶，結(jié)果細(xì)胞團(tuán)大片脫落，雖然有后續(xù)吹打步驟，但我覺得效果不佳。至于難消化的細(xì)胞，怎么掌握分寸，還待自己摸索或其他戰(zhàn)友分享。
2.在以上基礎(chǔ)上，我覺得細(xì)胞吹勻，這步比上述提到的十字移動等更為重要。如傳代1:4 ,可以收集所有細(xì)胞至離心管，加入培養(yǎng)液重懸混勻，吸管緩慢吹打20-30次，可配合水平搖晃離心管。
3.此外我覺得培養(yǎng)液的量可能也會有講究，如6孔板中你*終加入2ml細(xì)胞懸液，尤其像這樣的小面積培養(yǎng)皿，液體表面有張力，細(xì)胞易于聚集在中間，所以我一般6孔板再加1ml以消除影響，吸管緩慢吹打15-20次左右繼續(xù)混勻。
人表皮癌細(xì)胞 A431 15 11-2 & 13-1 & 28-5 DMEM/F-12 +10%FBS 貼壁
人表皮癌細(xì)胞 A431 3 7-3 & 25-2 DMEM+10%FBS+1%P/S 貼壁
人腎癌細(xì)胞 A498 3 11-2 MEM+10%FBS 貼壁
人肺癌細(xì)胞 A549 9 1-3 & 25-3 F12K+10%FBS+1%P/S 貼壁
人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞耐藥亞株 A549/DDP 10 7-3 & 9-2 &20-5 1640+10%FBS，添加PS，1%，1~2ug/ml DDP。
人橫紋肌瘤細(xì)胞 A673 11 5-4 &10-4 DMEM+10%FBS+1%P/S 貼壁
人腎癌細(xì)胞 A704 5 29-1 & 29-3 MEM+10%FBS 貼壁
大鼠胸大動脈平滑肌細(xì)胞 A7R5 6 12-3&33-1&17-4 DMEM+10%FBS+1%P/S 貼壁
人黑色素瘤細(xì)胞 A875 4 22-4 & 32-2 MEM+10%FBS 貼壁
人涎腺腺樣囊性癌細(xì)胞 ACC-2 10 32-1 1640+10%FBS+1%P/S 貼壁
人涎腺腺樣囊性癌細(xì)胞 ACC-3 7 24-2 & 23-5 1640+10%FBS+1%P/S 貼壁
人涎腺癌細(xì)胞 ACC-M 8 13-1 1640+10%FBS+1%P/S
人腎癌細(xì)胞 ACHN 9 26-5 MEM+10%FBS+1%P/S 貼壁
人胚腎細(xì)胞 AD-293 10 24-3 &7-5 &7-3 DMEM+10%FBS+1%P/S 貼壁
人胃腺癌細(xì)胞 AGS 6 3-4 &7-1 F12K +10%FBS+1%P/S
人骨髓漿細(xì)胞瘤株 AMO-1 6 33-1 1640+10%FBS+1%P/S 懸浮
