LTEP-sm【人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞】代數(shù)低,狀態(tài)好,發(fā)貨快,細(xì)胞庫管理規(guī)范,種類齊全,價格優(yōu)惠,在做傳代細(xì)胞培養(yǎng)之前,首先將培養(yǎng)瓶置于顯微鏡下,觀察培養(yǎng)瓶中細(xì)胞是否已長成致密單層,如已長成單層,即可進行細(xì)胞的傳代培養(yǎng)。
LTEP-sm【人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞】描述
細(xì)胞生長:貼壁
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞數(shù)量:1×106個
細(xì)胞傳代:1:3傳代,2-3天傳一代
細(xì)胞純度:92.2%
細(xì)胞活力:88.4%(Viability by Trypan Blue Exclusion)
細(xì)胞檢測:細(xì)胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、**、酵母和**
細(xì)胞凍存:液氮凍存(完全培養(yǎng)基+10%DMSO+20%FBS)
細(xì)胞運輸:干冰運輸(1
Vial)或活細(xì)胞運輸(T-25
flasks)
細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和**
LTEP-sm【人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞】培養(yǎng)條件
1640,90%;上等胎牛血清,10%
氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%
溫度:37攝氏度
LTEP-sm【人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞】傳代方法
顯微鏡下觀察細(xì)胞,當(dāng)覆蓋80%底面積時,進行細(xì)胞傳代。注意不要等到細(xì)胞覆蓋100%的時候才傳代,那樣細(xì)胞容易老化。在生物**柜或者超凈臺中,將培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基倒到廢液缸中用PBS或者生理鹽水洗一遍加入1.5ml
0.25%含有EDTA的胰酶,在37℃培養(yǎng)箱中消化3-5分鐘后取出細(xì)胞,加入5ml培養(yǎng)基,吹打均勻后,轉(zhuǎn)移到15ml離心管中,1000rpm 離心5分鐘離心后,去掉上清,用新鮮培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,按照1:3的比例進行細(xì)胞傳代培養(yǎng)。
LTEP-sm【人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞】傳代密度均勻,有以下幾點比較重要:
1.盡量消化細(xì)胞分散成單細(xì)胞懸液。對于易于消化的細(xì)胞,我一般DPBS清洗一遍,加0.5ml胰酶潤洗一遍(25cm2培養(yǎng)瓶或6孔板),棄掉胰酶,37度消化2-3分鐘或室溫消化5min左右,鏡下觀察是否細(xì)胞消化較為分散。如果不夠,延長消化時間。我見過有些剛進實驗室的師弟師妹,一上來就加1-2ml胰酶,結(jié)果細(xì)胞團大片脫落,雖然有后續(xù)吹打步驟,但我覺得效果不佳。至于難消化的細(xì)胞,怎么掌握分寸,還待自己摸索或其他戰(zhàn)友分享。
2.在以上基礎(chǔ)上,我覺得細(xì)胞吹勻,這步比上述提到的十字移動等更為重要。如傳代1:4 ,可以收集所有細(xì)胞至離心管,加入培養(yǎng)液重懸混勻,吸管緩慢吹打20-30次,可配合水平搖晃離心管。
3.此外我覺得培養(yǎng)液的量可能也會有講究,如6孔板中你*終加入2ml細(xì)胞懸液,尤其像這樣的小面積培養(yǎng)皿,液體表面有張力,細(xì)胞易于聚集在中間,所以我一般6孔板再加1ml以消除影響,吸管緩慢吹打15-20次左右繼續(xù)混勻。
大鼠背根神經(jīng)節(jié)細(xì)胞 DRG 7 34-1&34-2 DMEM+10%FBS 貼壁
鼠胚胎干細(xì)胞 E14 17 28-2 & 32-2 DMEM+15%FBS+1%L-Glu+1%NEAA+1%丙酮酸鈉+1%PS+1uL/mLβ-Me+0.1uL/mLLIF 培養(yǎng)瓶用0.1%明膠包被
人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞 EA,hy926 2 3-4 DMEM+10%FBS
人食管癌細(xì)胞 EC9706 5 24-5 DMEM+10%FBS 貼壁
人食管癌細(xì)胞 Eca-109 15 25-5&35-3 1640+10%FBS+1%P/S
小鼠T**細(xì)胞 E.G7-OVA 0 1640+10%FBS+4.5g/L葡萄糖+50uM b-ME+0.4mg/ml G418 懸浮 暫時不賣
人膀胱癌細(xì)胞 EJ 10 23-3 1640+10%FBS+1%P/S 貼壁
小鼠**瘤細(xì)胞 EL-4 16 2-2 & 3-4 DMEM +10%馬血清+1%P/S
小鼠血管內(nèi)皮瘤細(xì)胞 EOMA 6 24-2&33-5 DMEM+10%FBS 貼壁
人卵巢透明細(xì)胞癌細(xì)胞 ES-2 13 25-1 & 25-2 DMEM+10%FBS+1%P/S 貼壁
人腺癌細(xì)胞系 F56 10 14-2
甲狀腺癌細(xì)胞 FTC-133 16 26-2 & 27-1 & 27-2 1640+10%FBS+1%P/S 貼壁
人腎癌Wilms細(xì)胞 G401 4 29-2 Mccoy`s 5A +10%FBS 貼壁
小鼠神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞 G422 5 17-4 1640+10%FBS 貼壁
人胃黏膜上皮細(xì)胞 GES-1 5 26-4 &1-5 90%DMEM+10%FBS+1%P/S 貼壁
大鼠垂體瘤細(xì)胞 GH3 9 8-3&35-4 F12K+2.5%FBS+15%HS+1%P/S 懸浮