NKL【人NK細(xì)胞】發(fā)貨時(shí),保證細(xì)胞處于生長(zhǎng)對(duì)數(shù)期;貼壁細(xì)胞達(dá)到75%以上匯合度,約1×106/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶;傳代次數(shù)4代以內(nèi);凍存細(xì)胞發(fā)2個(gè)凍存管;無微生物污染。
NKL【人NK細(xì)胞】描述
細(xì)胞生長(zhǎng):懸浮
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞數(shù)量:1×106個(gè)
細(xì)胞傳代:1:3傳代,2-3天傳一代
細(xì)胞純度:92.2%
細(xì)胞活力:88.4%(Viability by Trypan Blue Exclusion)
細(xì)胞檢測(cè):細(xì)胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、**、酵母和**
細(xì)胞凍存:液氮凍存(完全培養(yǎng)基+10%DMSO+20%FBS)
細(xì)胞運(yùn)輸:干冰運(yùn)輸(1 Vial)或活細(xì)胞運(yùn)輸(T-25 flasks)
細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和**
NKL【人NK細(xì)胞】培養(yǎng)條件
1640,90%;上等胎牛血清,10%
氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%
溫度:37攝氏度
收到細(xì)胞后如何操作:
首先,觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有,請(qǐng)及時(shí)與我司聯(lián)系。
用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題,部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng),隔天再取出進(jìn)行觀察。仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等。
可將培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)多余的培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管中,備用;細(xì)胞傳代時(shí),可以將該培養(yǎng)基按照一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合使用,讓細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件。
確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)良好后,應(yīng)及時(shí)將細(xì)胞凍存,再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn),避免后期實(shí)驗(yàn)失誤可能發(fā)生細(xì)胞污染或死亡而導(dǎo)致的細(xì)胞丟失。
建議客戶收到細(xì)胞后前3天,100X、200X、400X各拍3-5張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和我司技術(shù)支持溝通交流。
預(yù)防細(xì)胞污染的注意事項(xiàng):
1.實(shí)驗(yàn)進(jìn)行前,超凈臺(tái)用紫外燈照射30-60min,然后用75%酒精擦拭超凈臺(tái)臺(tái)面,并開啟超凈臺(tái)風(fēng)機(jī)運(yùn)轉(zhuǎn)5-10min再開始實(shí)驗(yàn)操作。
2.實(shí)驗(yàn)用品用75%酒精擦拭后才能放入超凈臺(tái)內(nèi);實(shí)驗(yàn)用品用完應(yīng)移出超凈臺(tái),以利于空氣的流通;實(shí)驗(yàn)完成后用75%酒精擦拭超凈臺(tái)臺(tái)面。
3.每次操作只處理一種細(xì)胞;即使不同細(xì)胞使用相同的培養(yǎng)基也不要共享同一瓶培養(yǎng)基,避免細(xì)胞間的交叉污染。
4.操作時(shí)小心取用無菌的物品,避免污染。勿碰觸吸管尖頭,不小心碰觸后應(yīng)立即更換;不要在打開的容器瓶口正上方操作,容器打開后,傾斜45°操作,操作完成后及時(shí)蓋上瓶蓋。
5.CO2培養(yǎng)箱的清潔是較易被忽視的地方,應(yīng)1-2個(gè)月對(duì)培養(yǎng)箱定期進(jìn)行清潔**。先用75%酒精擦拭培養(yǎng)箱內(nèi)壁、隔板、水盤2-3次,用雙蒸水清洗,再用酒精棉球擦拭一遍,*后紫外燈照射4h以上。水盤內(nèi)加入無菌水(應(yīng)每周更換),待培養(yǎng)箱內(nèi)溫度、濕度、CO2濃度穩(wěn)定后再放入細(xì)胞。
6.定期清洗或更換超凈臺(tái)過濾膜、預(yù)濾網(wǎng)。
WI-38【人胚肺細(xì)胞】 D036 WI-38 人胚肺細(xì)胞 人 MEM 貼壁
WPMY-1【人正常前列腺基質(zhì)永生化細(xì)胞】 D037 WPMY-1 人正常前列腺基質(zhì)永生化細(xì)胞 人
Pt K1 (NBL-3)【袋鼠腎細(xì)胞】 D038 Pt K1 (NBL-3) 袋鼠腎細(xì)胞 長(zhǎng)鼻袋鼠
Ana-1【小鼠巨噬細(xì)胞】 D039 Ana-1 小鼠巨噬細(xì)胞 小鼠 1640 懸浮
MC3T3-E1 Subclone 14【小鼠顱頂前骨細(xì)胞亞克隆14】 D040 MC3T3-E1 Subclone 14 小鼠顱頂前骨細(xì)胞亞克隆14 小鼠
A9【小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞】 D041 A9 小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞 小鼠
L Wnt-3A【小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞】 D042 L Wnt-3A 小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞 小鼠
3T3-L1【小鼠胚胎成纖維細(xì)胞】 D043 3T3-L1 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞 小鼠 DMEM 貼壁
3T6-Swiss albino【小鼠胚胎成纖維細(xì)胞】 D044 3T6-Swiss albino 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞 小鼠 DMEM 貼壁
BALB/3T3 clone A31【小鼠胚胎成纖維細(xì)胞】 D045 BALB/3T3 clone A31 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞 小鼠 DMEM 貼壁
BNL CL.2【小鼠胚胎肝細(xì)胞】 D046 BNL CL.2 小鼠胚胎肝細(xì)胞 小鼠 DMEM 貼壁
C3H/10T1/2, Clone 8【小鼠胚胎成纖維細(xì)胞】 D047 C3H/10T1/2, Clone 8 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞 小鼠
NIH/3T3【小鼠胚胎細(xì)胞】 D048 NIH/3T3 小鼠胚胎細(xì)胞 小鼠 DMEM 貼壁
Psi2 DAP【小鼠胚胎成纖維細(xì)胞】 D049 Psi2 DAP 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞 小鼠
MS1【小鼠胰島內(nèi)皮細(xì)胞】 D050 MS1 小鼠胰島內(nèi)皮細(xì)胞 小鼠
SV40 MES 13【小鼠腎小球系膜細(xì)胞】 D051 SV40 MES 13 小鼠腎小球系膜細(xì)胞 小鼠
OP9【小鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞】 D052 OP9 小鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞 小鼠 1640 貼壁
C2C12【小鼠成肌細(xì)胞】 D053 C2C12 小鼠成肌細(xì)胞 小鼠 DMEM 貼壁