HGE【人牙齦上皮細(xì)胞】發(fā)貨時(shí),保證細(xì)胞處于生長對數(shù)期;貼壁細(xì)胞達(dá)到75%以上匯合度,約1×106/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶;傳代次數(shù)4代以內(nèi);凍存細(xì)胞發(fā)2個(gè)凍存管;無微生物污染。
HGE【人牙齦上皮細(xì)胞】描述
細(xì)胞生長:貼壁
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞數(shù)量:1×106個(gè)
細(xì)胞傳代:1:3傳代,2-3天傳一代
細(xì)胞純度:92.2%
細(xì)胞活力:88.4%(Viability by Trypan Blue Exclusion)
細(xì)胞檢測:細(xì)胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、**、酵母和**
細(xì)胞凍存:液氮凍存(完全培養(yǎng)基+10%DMSO+20%FBS)
細(xì)胞運(yùn)輸:干冰運(yùn)輸(1 Vial)或活細(xì)胞運(yùn)輸(T-25 flasks)
細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和**
HGE【人牙齦上皮細(xì)胞】培養(yǎng)條件
DMEM,90%;上等胎牛血清,10%
氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%
溫度:37攝氏度
收到細(xì)胞后如何操作:
首先,觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有,請及時(shí)與我司聯(lián)系。
用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題,部分貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng),隔天再取出進(jìn)行觀察。仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等。
可將培養(yǎng)瓶內(nèi)多余的培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管中,備用;細(xì)胞傳代時(shí),可以將該培養(yǎng)基按照一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合使用,讓細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件。
確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)良好后,應(yīng)及時(shí)將細(xì)胞凍存,再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn),避免后期實(shí)驗(yàn)失誤可能發(fā)生細(xì)胞污染或死亡而導(dǎo)致的細(xì)胞丟失。
建議客戶收到細(xì)胞后前3天,100X、200X、400X各拍3-5張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和我司技術(shù)支持溝通交流。
預(yù)防細(xì)胞污染的注意事項(xiàng):
1.實(shí)驗(yàn)進(jìn)行前,超凈臺用紫外燈照射30-60min,然后用75%酒精擦拭超凈臺臺面,并開啟超凈臺風(fēng)機(jī)運(yùn)轉(zhuǎn)5-10min再開始實(shí)驗(yàn)操作。
2.實(shí)驗(yàn)用品用75%酒精擦拭后才能放入超凈臺內(nèi);實(shí)驗(yàn)用品用完應(yīng)移出超凈臺,以利于空氣的流通;實(shí)驗(yàn)完成后用75%酒精擦拭超凈臺臺面。
3.每次操作只處理一種細(xì)胞;即使不同細(xì)胞使用相同的培養(yǎng)基也不要共享同一瓶培養(yǎng)基,避免細(xì)胞間的交叉污染。
4.操作時(shí)小心取用無菌的物品,避免污染。勿碰觸吸管尖頭,不小心碰觸后應(yīng)立即更換;不要在打開的容器瓶口正上方操作,容器打開后,傾斜45°操作,操作完成后及時(shí)蓋上瓶蓋。
5.CO2培養(yǎng)箱的清潔是較易被忽視的地方,應(yīng)1-2個(gè)月對培養(yǎng)箱定期進(jìn)行清潔**。先用75%酒精擦拭培養(yǎng)箱內(nèi)壁、隔板、水盤2-3次,用雙蒸水清洗,再用酒精棉球擦拭一遍,*后紫外燈照射4h以上。水盤內(nèi)加入無菌水(應(yīng)每周更換),待培養(yǎng)箱內(nèi)溫度、濕度、CO2濃度穩(wěn)定后再放入細(xì)胞。
6.定期清洗或更換超凈臺過濾膜、預(yù)濾網(wǎng)。
NCI-H929細(xì)胞 人骨髓瘤細(xì)胞 1640+10%FBS+1%P/S+50uM 2-巰基乙醇 懸浮
NCTC1469細(xì)胞 小鼠正常肝細(xì)胞 DMEM +10%馬血清+1%P/S
NCTC clone 1469細(xì)胞 小鼠肝上皮細(xì)胞 DMEM +10%馬血清+1%P/S
neuro-2a細(xì)胞 小鼠腦神經(jīng)瘤細(xì)胞 MEM+10%FBS+1%P/S 貼壁
NK-92細(xì)胞 人惡性非霍奇金**瘤患者的自然殺傷細(xì)胞 1640+0.2mM肌醇,0.1mM β-Me,0.02mM葉酸,100U IL-2,馬血清12.5%,上等胎牛血清,12.5%。
NIH/3T3細(xì)胞 小鼠胚胎細(xì)胞 DMEM+15%FBS+1%P/S 小牛血清培養(yǎng)不好
NR8383細(xì)胞 大鼠肺泡巨噬細(xì)胞 F12K+15%FBS+2 mM L-谷氨酰胺+ 1%P/S 懸浮和貼壁混合
NRK-52E細(xì)胞 大鼠腎細(xì)胞 DMEM+10%小牛血清+10ng/mlEGF+1%P/S 貼壁(FBS養(yǎng)不好)
OAR-L1細(xì)胞 綿羊肺成纖維細(xì)胞 DMEM+10%FBS+ 1%P/S 貼壁
OCM-1A細(xì)胞 人低侵襲性脈絡(luò)膜黑色素瘤細(xì)胞 1640+10%FBS+1%P/S
OCI-LY10細(xì)胞 彌漫大B細(xì)胞**瘤細(xì)胞? 1640+10%FBS+1%P/S 懸浮
OP9細(xì)胞 小鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞 MEM-a(無核苷)+20%FBS + 1%P/S 貼壁
OPM2細(xì)胞 人骨髓瘤細(xì)胞 1640+10%FBS+1%P/S+50uM 2-巰基乙醇 懸浮
OS-RC-2細(xì)胞 人腎癌細(xì)胞 1640+10%FBS+ 1%P/S 貼壁
OV-90細(xì)胞 人卵巢癌細(xì)胞 M199+15%FBS + 1%P/S 貼壁
OVCAR-3細(xì)胞 人卵巢腺癌細(xì)胞 1640 + 20% FBS +0.01毫克/毫升牛胰島素+ 1%P/S
P19細(xì)胞 小鼠畸胎瘤細(xì)胞 MEMα+小牛血清,7.5+胎牛血清,2.5%。+ 1%P/S