ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)測(cè)定標(biāo)本分化

ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)測(cè)定標(biāo)本分化

（1）標(biāo)本溶血
ELISA試劑盒因?yàn)楦鞣N人為要素致使的標(biāo)本溶血，均可因紅細(xì)胞損壞溶解時(shí)釋放出很多具有過(guò)氧化物酶活性的血紅蛋白，在以辣根過(guò)氧化物酶為符號(hào)的ELISA測(cè)定中，會(huì)致使非特異性顯色，攪擾測(cè)定成果。為戰(zhàn)勝上述攪擾效果，標(biāo)本收集時(shí)有必要留意防止溶血。
（2）標(biāo)本受**污染
因菌體中也許富含內(nèi)源性辣根過(guò)氧化物酶，因而，被**污染的標(biāo)本同溶血標(biāo)本相同，亦可發(fā)生非特異性顯色而攪擾測(cè)定成果。
（3）標(biāo)本保留不妥
ELISA試劑盒在冰箱中保留過(guò)久的標(biāo)本，血清中IgG可聚組成多聚體、AFP可構(gòu)成二聚體，在間接法ELISA測(cè)定中會(huì)致使本底過(guò)深、乃至造成假陽(yáng)性；標(biāo)本放置時(shí)刻過(guò)長(zhǎng)（如**以上），有時(shí)抗原或抗體**活性削弱，亦可呈現(xiàn)假陰性。為戰(zhàn)勝上述攪擾，ELISA測(cè)定的血清標(biāo)本宜為新鮮收集；如不能當(dāng)即測(cè)定，5天內(nèi)測(cè)定的血清標(biāo)本可存放于4℃，1周后測(cè)定的血清標(biāo)本應(yīng)低溫凍存；凍存后融解的標(biāo)本，蛋白質(zhì)部分濃縮，散布不均，應(yīng)充沛混合后再測(cè)定，但混勻時(shí)應(yīng)輕柔，不行激烈振蕩。
（4）標(biāo)本凝集不全
在沒(méi)有促凝劑和抗凝劑存在的狀況下，正常血液收集后1/2~2h開(kāi)端凝結(jié)，18~24h徹底凝結(jié)。臨床查驗(yàn)工作中，有時(shí)為了爭(zhēng)取時(shí)刻迅速檢查，常在血液還未開(kāi)端凝結(jié)時(shí)即強(qiáng)行離心別離血清，此時(shí)的血清中仍殘留部分纖維蛋白原，在ELISA測(cè)定過(guò)程中能夠構(gòu)成肉眼可見(jiàn)的纖維蛋白塊，易造成假陽(yáng)性成果；這類(lèi)狀況于次日復(fù)查時(shí)因血凝已徹底，血清中不再有纖維蛋白原存在，故復(fù)查成果變?yōu)殛幮浴榉乐股鲜鰯嚁_效果，解決的辦法*佳是血液標(biāo)本收集后有必要使其充沛凝結(jié)后再別離血清，或標(biāo)本收集時(shí)用帶別離膠的采血管或于采血管中參加適當(dāng)?shù)拇倌齽?br /> （5）標(biāo)本管中增加物質(zhì)的影響
ELISA試劑盒抗凝劑（如肝素，EDTA）、酶抑制劑（如NaN3可抑制ELISA體系中辣根過(guò)氧化物酶活性）及迅速別離血清的別離膠等均對(duì)ELISA測(cè)定有必定攪擾效果。
經(jīng)過(guò)以上的剖析和總結(jié)，臨床查驗(yàn)ELISA測(cè)定中呈現(xiàn)假陽(yáng)性或假陰性等過(guò)錯(cuò)的成果，掃除ELISA試劑盒要素和操作要素，再有即是從標(biāo)本要素進(jìn)行剖析，并應(yīng)采納相應(yīng)措施掃除攪擾，然后保證檢查成果的準(zhǔn)確性。

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