ELISA試劑盒實驗前應做哪些準備
1、仔細閱讀說明書,確定試劑盒在有效期內。 2、按說明書確定所有試劑是否齊全,完整的Sunny ELISA檢測試劑盒包含預包被酶標板,檢測抗體、鏈霉親合素標記的HRP、標準品、標準品稀釋液、TMB顯色液、終止液、洗液等10個組分,另外要確認試劑盒以外的材料是否齊全,如酶標儀、移液器及槍頭、加樣槽、離心管、量筒、蒸餾水、稀釋用聚丙烯試管等。 3、實驗前,將試劑盒從冰箱中取出,室溫放置半個小時,以讓試劑恢復到室溫。 4、將10×的檢測緩沖液(Assay Buffer)稀釋到1×,吸取10X濃縮Assay buffer 5mL至50mL離心管,加蒸餾水至 50Ml,震蕩混勻備用。 ELISA試劑盒實驗結果分析: 一、孵育完畢后取出微孔板,如果采用水浴法,用吸水紙吸干外壁的水分。 二、在微孔后面放置一張白紙并觀察孔內的顏色變化,從微孔壁側面所能觀察的顏色比從頂部或者底部所能觀察到的更準確。 三、有時候孵育時在微孔側旁會出現氣泡,可以在沒有氣泡的另一側進行觀察,對于一些顏色介于陰性和陽性質控的樣品,需要進行更進一步的分析和重測。 四、試劑的準備孔板(條或孔)和陽性和陰性質控臨用前取出,應在室溫下放置至少半小時,不使用的微孔板應置于2-8°C保存,剩余的陽性和陰性質控應放回原處冰凍保存。
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