無內**高純質粒中量提取試劑盒(離心柱型)產品介紹
本試劑盒采用改進SDS-堿裂解法裂解細胞，粗提物通過獨特的過濾柱選擇性結合離心除去內**，然后離心吸附柱內的硅基質膜在高鹽、低pH值狀態下選擇性地結合溶液中的質粒DNA，再通過去蛋白液和漂洗液將雜質和其它**成分去除，*后低鹽、高pH值的洗脫緩沖液將純凈質粒DNA從硅基質膜上洗脫。
無內**高純質粒中量提取試劑盒(離心柱型)產品特點
1. 不需要使用有毒的苯酚，氯仿等試劑，也不需要乙醇沉淀。快速，方便，從50ml大腸桿菌LB(Luria-Bertani)培養液中，可快速提取0.2～
0.4mg純凈的高拷貝質粒DNA，提取率達80～90﹪。
2. 獲得的質粒產量高，超螺旋比例高，純度好，可直接用于酶切、轉化、PCR、體外轉錄、測序、轉染等各種分子生物學實驗。
產品儲存
本產品收到后按照說明書指示溫度存放各成份，儲存18個月不影響使用效果。
無內**高純質粒中量提取試劑盒(離心柱型)自備試劑
無水乙醇
注意事項
1. 提取的質粒量與**培養濃度、質粒拷貝數等因素有關。如果所提質粒為低拷貝質粒或大于10kb的大質粒，應加大菌體使用量，同時按比例
增加P1、P2、P3的用量，洗脫緩沖液應在70℃預熱。可以適當的延長吸附和洗脫的時間，以增加提取效率。
無內**高純質粒中量提取試劑盒(離心柱型) 2. 得到的質粒DNA可用瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計檢測濃度與純度。OD260值為1相當于大約50μg/ml DNA。電泳可能為單一條帶，也可
能為2條或者多條DNA條帶，這主要是不同程度的超螺旋構象質粒泳動位置不一造成，與提取物培養時間長短、提取時操作劇烈程度等有關。
本公司產品正常操作情況下基本超螺旋可以超過90%。
3. 質粒DNA確切分子大小，必須酶切線性化后，對比DNA分子量Marker才可以知道。處于環狀或者超螺旋狀態的的質粒，泳動位置不確定，無法
通過電泳知道其確切大小。
4. 洗脫液EB不含有螯合劑EDTA，不影響下游酶切、連接等反應。也可以使用水洗脫，但應該確保pH大于7.5，pH過低影響洗脫效率。用水洗
脫，質粒應該保存在－20℃。質粒DNA如果需要長期保存，可以用TE緩沖液洗脫（10mM Tris-HCl，1mM EDTA，pH 8.0），但是EDTA可能影響
下游酶切反應，使用時可以適當稀釋。
