大型/大量質粒提取試劑盒(溶液型、轉染型)產品介紹
本試劑盒用堿裂解法從培養菌中提取質粒DNA,采用獨特的溶液配方和內****試劑,只需要幾次簡單離心去除蛋白質、多糖、內**、RNA等雜質,獲得高質量的質粒DNA。純化DNA的OD260/280通常在1.8左右,得到的質??芍苯討糜诩毎D染甚至動物體內實驗等對DNA純度要求很高的工作中。純化后期過程均在Eppendorf管中操作,方法簡單,不需特殊設備,無需過柱,不用酚氯仿抽提;基本可完全回收**裂解釋放出的質粒,不必擔心質粒DNA的丟失。本方法提取純化質粒DNA,對質粒損傷小,即使是10kb甚至100kb以上的大型質?;虺笮虰AC/PAC質粒,只要堿裂解法能夠提取,就可以有效純化。
大型/大量質粒提取試劑盒(溶液型、轉染型)產品特點
1. 不需要使用有毒的苯酚,氯仿等試劑,也不需要乙醇沉淀??焖?、方便、從100-140ml大腸桿菌LB(Luria-Bertani)培養液中,可快速提取
0.2-0.5mg純凈的高拷貝質粒DNA,提取率達80-90%。
2. 獲得的質粒產量高,超螺旋比例高,純度好,可直接用于酶切、轉化、PCR、體外轉錄、測序等各種分子生物學實驗。
3. 內**含量極低(<10 EU/μg DNA),可直接應用于細胞轉染。
產品儲存
本產品收到后按照說明書指示溫度存放各成份,儲存18個月不影響使用效果。
大型/大量質粒提取試劑盒(溶液型、轉染型)自備試劑
異丙醇、70%乙醇、TE
注意事項
1. 提取的質粒量與**培養濃度、質??截悢档纫蛩赜嘘P。如果所提質粒為低拷貝質粒或大于10kb的大質粒,應加大菌體使用量,同時按比例
增加P1、P2、P3的用量。
2. 提取大質粒時操作動作要輕柔,應該使用剪大了開口的吸頭,防止機械剪切對DNA的損壞。
大型/大量質粒提取試劑盒(溶液型、轉染型) 3. DNA沉淀液沉淀離心后,可能看不到明顯沉淀。如未見沉淀,擔心DNA丟失,可保留上清液,待完成全部操作后電泳鑒定,以確定是否獲得終
產物(數百微克DNA離心沉淀在管的側壁上,可能無法看到明顯團塊)。
4. 得到的質粒DNA可用瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計檢測濃度與純度。OD260值為1相當于大約50μg/ml DNA。電泳可能為單一條帶,也可
能為2條或者多條DNA條帶,這主要是不同程度的超螺旋構象質粒泳動位置不一造成,與提取物培養時間長短、提取時操作劇烈程度等有關。
本公司產品正常操作情況下基本超螺旋可以超過95%。
實驗圖例