Bradford 法蛋白定量試劑盒產品介紹
Bradford法蛋白定量試劑盒是在世界上常用的蛋白濃度檢測方法之一Bradford法基礎上(考馬斯亮藍結合顯色法)改進而成。當Bradford染色液(考馬斯亮藍)和蛋白在酸性條件下結合時,*大吸光值波長立刻由465 nm轉移至595nm,同時顏色由褐色轉為藍色,通過測定吸光值大小并對照標準蛋白的吸光值,推算出蛋白濃度。 Bradford 法蛋白定量試劑盒
產品特點
1. 靈敏度高,檢測濃度下限達到25μg/ml,*小檢測蛋白量達到0.5μg,待測樣品體積為1-20μl。
2. 檢測速度極快,10-20個樣品只需不足10分鐘即可完成。
3. 在50-1000μg/ml濃度范圍內有較好的線性關系。 Bradford 法蛋白定量試劑盒
產品儲存
本產品收到后按照說明書指示溫度存放各成份,至少九個月內有效。
注意事項
1. Bradford染色液含有刺激性或者腐蝕性化合物,操作時要戴乳膠手套,避免沾染皮膚,眼睛和衣服。若沾染皮膚、眼睛時,要用大量清水或
者生理鹽水沖洗。
2. Bradford染色液中考馬斯亮藍易聚集成團,每次使用前請顛倒6-8次并且豎直抓住瓶口做水平劃圈動作,旋轉瓶中液體,幫助充分混勻,但
不可以上下振蕩混勻。
3. 低溫會降低Bradford染色液的敏感度,因此每次使用前應該使Bradford染色液回復到室溫。僅僅將需要的Bradford染色液復溫,可以減少復
溫時間。倒出每次需要的Bradford染色液回復到室溫,將原瓶放回冰箱。
Bradford 法蛋白定量試劑盒 4. 蛋白標準請在全部溶解后先混勻,再稀釋成一系列不同濃度的蛋白標準。標準品曲線配制時,如果吸量不準確或者加樣槍不**會造成標準
曲線相關系數減小,可根據需要使用倍比梯度稀釋的方法來配制,或者使用**度高的加樣槍。
5. 由于Bradford法在蛋白濃度增高到一定時候,顏色反應并不成比例增加,因此得到的標準曲線只是在一定范圍內可以近似看成直線,每次應
按照實際測得的標準曲線計算出大致**的蛋白濃度。
6. 需要酶標儀一臺,*佳檢測波長為595nm,也可以在570-610nm之間波長測定,但會降低一些敏感度;并需96孔板。如果沒有酶標儀,也可以
使用普通的分光光度計測定,但是測定蛋白濃度時,需根據測定吸光度的杯子的體積,按比例調整Bradford染色液和樣品的體積。使用分光
光度計測定蛋白濃度時,每個試劑盒可以測定的樣品數量可能會顯著減少
7. Bradford法測定蛋白濃度不受絕大部分樣品中的化學物質的影響,樣品中巰基乙醇的濃度可高達1M,二硫蘇糖醇的濃度可高達5mM。但受略
高濃度的去垢劑影響。需確保SDS低于0.125%,Triton X-100低于0.125%,Tween 20低于0.06%。可以考慮用超純水稀釋,透析/除鹽,
ACETONE/TCA沉淀蛋白后重溶于超純水等方法來消除干擾物質的影響。