hEM15A【人**異位內膜上皮細胞永生化細胞】代數低,狀態好,發貨快,細胞庫管理規范,種類齊全,價格優惠,在做傳代細胞培養之前,首先將培養瓶置于顯微鏡下,觀察培養瓶中細胞是否已長成致密單層,如已長成單層,即可進行細胞的傳代培養。
hEM15A【人**異位內膜上皮細胞永生化細胞】描述
細胞生長:貼壁
細胞形態:上皮細胞樣
細胞數量:1×106個
細胞傳代:1:3傳代,2-3天傳一代
細胞純度:92.2%
細胞活力:88.4%(Viability by Trypan Blue Exclusion)
細胞檢測:細胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、**、酵母和**
細胞凍存:液氮凍存(完全培養基+10%DMSO+20%FBS)
細胞運輸:干冰運輸(1
Vial)或活細胞運輸(T-25
flasks)
細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和**
hEM15A【人**異位內膜上皮細胞永生化細胞】培養條件
EMEM,90%;上等胎牛血清,10%
氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%
溫度:37攝氏度
hEM15A【人**異位內膜上皮細胞永生化細胞】傳代方法
顯微鏡下觀察細胞,當覆蓋80%底面積時,進行細胞傳代。注意不要等到細胞覆蓋100%的時候才傳代,那樣細胞容易老化。在生物**柜或者超凈臺中,將培養瓶中的培養基倒到廢液缸中用PBS或者生理鹽水洗一遍加入1.5ml
0.25%含有EDTA的胰酶,在37℃培養箱中消化3-5分鐘后取出細胞,加入5ml培養基,吹打均勻后,轉移到15ml離心管中,1000rpm 離心5分鐘離心后,去掉上清,用新鮮培養基重懸細胞,按照1:3的比例進行細胞傳代培養。
hEM15A【人**異位內膜上皮細胞永生化細胞】傳代密度均勻,有以下幾點比較重要:
1.盡量消化細胞分散成單細胞懸液。對于易于消化的細胞,我一般DPBS清洗一遍,加0.5ml胰酶潤洗一遍(25cm2培養瓶或6孔板),棄掉胰酶,37度消化2-3分鐘或室溫消化5min左右,鏡下觀察是否細胞消化較為分散。如果不夠,延長消化時間。我見過有些剛進實驗室的師弟師妹,一上來就加1-2ml胰酶,結果細胞團大片脫落,雖然有后續吹打步驟,但我覺得效果不佳。至于難消化的細胞,怎么掌握分寸,還待自己摸索或其他戰友分享。
2.在以上基礎上,我覺得細胞吹勻,這步比上述提到的十字移動等更為重要。如傳代1:4 ,可以收集所有細胞至離心管,加入培養液重懸混勻,吸管緩慢吹打20-30次,可配合水平搖晃離心管。
3.此外我覺得培養液的量可能也會有講究,如6孔板中你*終加入2ml細胞懸液,尤其像這樣的小面積培養皿,液體表面有張力,細胞易于聚集在中間,所以我一般6孔板再加1ml以消除影響,吸管緩慢吹打15-20次左右繼續混勻。
人骨髓漿細胞瘤株 AMO-1 6 33-1 DMEM+10%FBS+1%P/S 懸浮
人**內膜腺癌細胞 AN3CA 6 21-1&5-3 MEM+10%FBS+1%P/S 貼壁
小鼠巨噬細胞 Ana-1 7 14-3 & 16-2 1640+10%FBS+1%P/S 懸浮
大鼠胰腺外分泌細胞 AR42J 14 2-2 & 18-4&35-3&35-4 F12K+20%FBS 貼壁
人視網膜上皮細胞 ARPE-19 8 9-4 & 15-2 & 23-2&18-5 D/F12+10%FBS+1%P/S 貼壁
小鼠胚胎瘤細胞 ATDC5 0 90%DMEM+10%FBS+1%P/S 貼壁 污染
大鼠主動脈平滑肌細胞 ATR5 4 12-3 D/F12+10%FBS+1%P/S 貼壁
人胃癌細胞 AZ-521 8 29-1 1640+10%FBS 貼壁
小鼠黑色素瘤細胞 B16 7 11-1 & 11-3 1640+10%FBS+1%P/S 貼壁
小鼠黑色素瘤細胞 B16BL6 9 22-4&22-5 1640+10%小牛血清 貼壁
小鼠黑色素瘤細胞 B16-F10 7 10-3 & 17-3 DMEM+10%FBS+1%P/S 貼壁
EBV 轉化的絨猴白細胞 B95-8 12 1-5&18-3 1640+10%FBS 貼壁
小鼠胚胎成纖維細胞 BALB/3T3 clone A31 12 13-2 & 14-1 &4-5 DMEM+10%FBS 80%密度時1:2傳代,生長慢,傳代密度要大
小鼠胚胎成纖維細胞 BALB/3T3 clone A31 5 7-5 DMEM+10%FBS 80%密度時1:3傳代,生長慢,傳代密度要大 狀態OK
小鼠原B細胞株 BAF3 23 15-3 & 16-2 & 26-3 & 28-5&34-2 1640+10FBS加10ng/ml IL-3 懸浮
人膀胱移行細胞癌 BC-3C 8 9-2 DMEM+10%FBS+1%P/S 貼壁
人乳腺癌細胞 Bcap-37 5 9-1 1640+10%FBS+1%P/S