為什么同一批次提取蛋白跑出的條帶不一致
在做蛋白提取實驗中,也許有的同學都會提出這樣的疑問:每次提蛋白后會將樣品在短時間內重復2-3次WB,但是每次跑出的條帶趨勢不一致,上樣量和其他條件都沒有變,內參基本是整齊穩定的,不知道為什么目的條帶就是不一致?這是什么原因呢?
影響因素太多了,實驗中的任何任何一個步驟稍微有點差異都能產生不同的結果,下面簡單說三點,可以用作參考。
1.你蛋白的問題,雖然是同一批的,但是可能在蛋白表達與純化過程中難免會出現個別的異類;
2.你的操作流程,不管做什么都會有誤差,不可能每次的做的都一樣,我們只能減少誤差,所以可能你覺得自己每次都做得一樣,但某個小細節你并沒有發現;
3.試劑,也許你的試劑已經不能用了,或者溶度不對了都會影響你的實驗。
做一個實驗來說**原則就是精準,也許你這次做出來了下次就做不出來了,每次做的時候寫下來,不要嫌麻煩,這樣做錯了能省很多時間。